تراسفکشن پایدار سلول های استرومایی مغز استخوان توسط وکتورpsectag۲/hygroa-cntf به منظور استفاده در درمان ضایعات نخاعی

مقدمه و هدف: ژن (cntf) که یکی از اعضای خانواده ژن های نوروتروفیک است، در محافظت بقا گانگلیون های سیلیاری و نورونی شرکت دارد. cntf تمایز و بقای گونه های مختلف نورون های حسی ، حرکتی، اتونوم و الیگودندروسیت ها را افزایش می دهد. به منظور افزایش خاصیت نوروتروفیکbmscs پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf ساخته و با استفاده از لیپوفکتامین وارد سلول های bmscs شد. مواد و روش ها: پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf ساخته شد و با استفاده از سکانسینگ مورد تأیید قرارگرفت و با استفاده از لیپوفکتامین به سلول های bmscs، وارد شد.میزان رونویسی در ژن مورد نظر توسط rt-pcr محاسبه و میزان بیان پروتئین با استفاده از وسترن بلات و الیزا بررسی شد. نتایج: سکانسینگ نشان داد که پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf، دارای توالی صحیحی است. پس از ترانسفکشن، بیان ژن cntf و بیان پروتئینی آن با استفاده از rt-pcr و وسترن بلات تأییدشد. نتیجه گیری: پلاسمید psec-tag2/hygroa-cntf با داشتن بیان مناسب در سلول های bmscs می تواند درصورت پیوند، سبب افزایش بازسازی سلول های آسیب دیده پس از ضایعه نخاعی شود.